|
 |
|
с международным участием «Водоросли: проблемы таксономии, экологии и использование в мониторинге», посвященной памяти Веры Ивановны Есыревой (Нижний Новгород) Предварительные результаты применения двух методов изучения почвенных диатомовых водорослей
Буевич Т.А., Чудаев Д.А., Гололобова М.А. Tatiana A. Buevich, Dmitry A. Chudaev, Maria A. Gololobova
Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова,
УДК 582.26
В работе представлены предварительные результаты применения двух методов выделения диатомовых водорослей из почвы в ходе исследования почвенных водорослей Звенигородской биостанции МГУ. Авторы сравнивают классический метод чашечных культур со стеклами обрастания и метод выделения диатомовых водорослей из почвы с помощью чашечных культур с марлей, помещённой на поверхность почвы. Методы применили для выделения диатомовых водорослей из образцов почвы, взятых в двух биотопах – в березняке и пойме реки. Показано, что основным преимуществом метода стекол обрастания является получение дополнительных данных об активной жизнедеятельности водорослей в почве, так как многие водоросли образуют на поверхности стёкол клоны в результате деления клеток. В то же время, с помощью марлевых культур можно получить более богатые клетками препараты лучшего качества, так как при использовании этого метода панцири диатомовых лучше очищаются от органики. Оба метода имеют свои преимущества и недостатки, и для получения более полных результатов авторы рекомендуют использовать их совместно Ключевые слова: почвенные водоросли; диатомовые водоросли; Bacillariophyceae; методы изучения почвенных водорослей; стекла обрастания
Водоросли являются важным компонентом сообщества почвенных микроорганизмов. Почвенная альгофлора играет огромную роль в заселении участков почвы, непригодных для роста высших растений, на начальных стадиях сукцессий, и принимает активное участие в почвообразовании и накоплении органического вещества (Голлербах, Штина, 1969). Микроводоросли, обитающие в почве, зачастую обладают мелкими размерами и бедной морфологией, что затрудняет их идентификацию. Кроме того, численность водорослей в почве достаточно мала, что ставит проблему концентрирования и выделения организмов при изучении почвенных водорослей. Диатомовые водоросли (достаточно распространенные в почве) выгодно отличаются от других групп. Разнообразная структура их панцирей позволяет идентифицировать водоросли, относящиеся к этой группе. Еще одним преимуществом диатомовых водорослей является то, что идентифицировать их можно даже не в живом состоянии, что расширяет возможности для применения методов выделения водорослей из почвы. В данном эксперименте мы применили и сравнили между собой два метода выделения диатомовых водорослей из почвы: классический метод чашечных культур со стеклами обрастания (Lund, 1945) и метод выделения водорослей с помощью марли. Этот метод представляет собой модифицированный нами для почвы метод выделения бентосных диатомовых из песка или ила (Round et al., 1990). Образцы двух типов почв (пойменной почвы и почвы из березняка) были собраны на территории Звенигородской биостанции МГУ в 2017 г. Образцы помещали в чашки Петри и инкубировали при естественном освещении и комнатной температуре с использованием двух вышеупомянутых методов для каждого типа почвы. Каждую неделю снимали стекла и марлю с одной из чашек. Стекла и марлю в дальнейшем использовали для приготовления постоянных препаратов для изучения диатомовых водорослей. Для этого стёкла обрастания прокаливали на плитке, промывали их слабым раствором соляной кислоты и дистиллированной водой, а затем высушенные стекла с компонентами панцирей диатомовых заключали в анилин-формальдегидную смолу Эльяшева (Эльяшев, 1957). Водоросли, поселившиеся на марле, смывали спиртовым раствором, после чего для очистки панцирей применяли кипячение в растворе перекиси водорода и промывание соляной кислотой и дистиллированной водой. Полученную суспензию наносили на покровные стекла и высушивали. Стекла с высушенным материалом использовали для приготовления препаратов. В этом эксперименте (как и в прошлых наших экспериментах) стекла обрастания зарекомендовали себя как работающий прием, имеющий, однако, некоторые сложности в применении. Например, обнаружилось, что при прокаливании стекол панцири сохраняют целостность, и поэтому при заключении в смолу большое число панцирей оказывается заполненными воздухом, а это затрудняет их изучение в световой микроскоп. К тому же, многие препараты были очень бедны диатомовыми, или клетки там вовсе отсутствовали. Именно эти причины побудили нас искать другие способы сконцентрировать обитающие в почве диатомовые водоросли, что привело к идее эксперимента с использованием марлевых культур. С использованием этого метода, действительно, удается получить богатые клетками препараты с панцирями, свободными от органики. Однако метод имеет свои ограничения. Марля – материал, неустойчивый в условиях контакта с почвенными микроорганизмами. В чашках с пойменной почвой уже к третьей–четвертой неделе инкубации марля оказалась разрушена. В почве из березняка такого эффекта не наблюдалось, что, вероятно, связано с другим составом или меньшей активностью почвенной микробиоты. Также, метод с марлей оказался менее информативен, так как в препаратах, полученных из стекол обрастания, можно наблюдать клоны диатомовых водорослей, которые на этом стекле развивались, а в случае марли такие наблюдения невозможны. Кроме того, в культурах со стёклами обрастания заметна динамика заселения субстрата. При длительной инкубации увеличивается число клеток на стёклах и также увеличивается количество отмеченных клонов. В препараты, полученные с помощью марли, попадает больше видов, нехарактерных для почв (центрических, очень крупных и планктонных диатомей), что особенно заметно при изучении пойменной почвы, хотя и в препаратах, полученных этим методом, из почвы березняка также были эпизодически отмечены центрические диатомовые (табл. 1). Подобный эффект можно объяснить неудачным выбором места для сбора образцов (слишком близко к воде) и методическими ошибками при подготовке препаратов (возможно, имело место попадание небольшого числа панцирей из одного образца в другой). Использование стекол обрастания позволяет уменьшить влияние подобных ошибок за счет того, что в нем выявляются преимущественно особи, ведущие активную жизнедеятельность в почве. Так, в препаратах, изготовленных из стекол обрастания, инкубировавшихся на почве из березняка, центрических диатомей обнаружено не было. Сравнительна характеристика двух методов представлена в таблице 2.
Таблица 1. Содержание центрических диатомей и количество отмеченных клонов диатомовых в различных препаратах Table 1. The content of centric diatoms and the number of noticed diatom clones in different preparations
Таблица 2. Сравнительная характеристика постоянных препаратов, Table 2. Comparative characteristics of permanent preparations
Список литературы
Статья поступила в редакцию 30.06.2020
Об авторах Буевич Татьяна Андреевна – Tatiana A. Buevich аспирант, Московский государственный университет им. М.В.Ломоносова, Москва, Россия (Lomonosov Moscow State University, Moscow, Russia), биологический факультет, кафедра микологии и альгологии arrana-w@yandex.ru Чудаев Дмитрий Алексеевич – Dmitry A. Chudaev кандидат биологических наук chudaev@list.ru Гололобова Мария Александровна – Maria A. Gololobova кандидат биологических наук gololobovama@mail.ru Корреспондентский адрес: Россия, 119234, г. Москва, Ленинские горы, д. 1, стр. 12, Биологический факультет МГУ. Телефон (495)-939-27-64.
ССЫЛКА: Буевич Т.А., Чудаев Д.А., Гололобова М.А. Предварительные результаты применения двух методов изучения почвенных диатомовых водорослей // Вопросы современной альгологии. 2021. №1 (25). С. 105-109. URL: http://algology.ru/1677 DOI – https://doi.org/10.33624/2311-0147-2021-1(25)-105-109
Уважаемые коллеги! Если Вы хотите получить версию статьи в формате PDF, пожалуйста, напишите в редакцию, и мы ее вам с удовольствием пришлем бесплатно.
Preliminary results of the application of two methods for studying soil diatoms Tatiana A. Buevich, Dmitry A. Chudaev, Maria A. Gololobova Lomonosov Moscow State University (Moscow, Russia) Preliminary results of applying two methods for isolating diatoms from the soil that were used during the study of soil algae of the Zvenigorod Biological Station of Moscow State University are presented in this paper. The authors compare the classical method of moist chambers with fouling glasses and the method of isolating diatoms from the soil using moist plates with gauze placed on the surface of the soil. The methods were used to isolate diatoms from soil samples taken in two biotopes – in a birch forest and in a river floodplain. It has been shown that the main advantage of the method of fouling glasses is the reception of additional data on the active life of algae in the soil, since many algae form clones on the surface of the glass as a result of cell division. At the same time, with the help of gauze cultures, it is possible to obtain preparations that contain more material of better quality, since the shells of diatoms can be better cleaned from organics using this method. Both methods have their advantages and disadvantages, and to obtain more complete results, the authors recommend using them together. Key words: soil algae; diatom algae; Bacillariophyceae; methods of soil algae studying; fouling glass
References
Authors Buevich Tatiana A. ORCID – https://orcid.org/0000-0002-2924-6632 Lomonosov Moscow State University, Moscow, Russia arrana-w@yandex.ru Chudaev Dmitry A. ORCID – https://orcid.org/0000-0002-8407-6832 Lomonosov Moscow State University, Moscow, Russia chudaev@list.ru Gololobova Maria A. ORCID – https://orcid.org/0000-0003-0781-603X Lomonosov Moscow State University, Moscow, Russia gololobovama@mail.ru
ARTICLE LINK: Buevich T.A., Chudaev D.A., Gololobova M.A. Preliminary results of the application of two methods for studying soil diatoms. Voprosy sovremennoi algologii (Issues of modern algology). 2021. № 1 (25). P. 105–109. URL: http://algology.ru/1677 DOI – https://doi.org/10.33624/2311-0147-2021-1(25)-105-109 When reprinting a link to the site is required
На ГЛАВНУЮ
К разделу ОБЗОРЫ, СТАТЬИ И КРАТКИЕ СООБЩЕНИЯ
|
|
|
 | | ||
|
| ||
